藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF
藍(lán)色-瓊脂糖凝膠FF
（Blue-Berpharose FF）
1.產(chǎn)品介紹
藍(lán)色-瓊脂糖凝膠FF是一種將活性藍(lán) 3G鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，主要用于純化白蛋白、干擾素、需要核苷酸輔助的酶、ɑ2-巨球蛋白凝血因子等。
2.規(guī)格
1ml（預(yù)裝柱）、5ml（預(yù)裝柱）、10ml（預(yù)裝柱）、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程
應(yīng)用舉例：人血清白蛋白（HSA）的純化
平衡緩沖液：50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、pH7.0
結(jié)合緩沖液：50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、pH7.0
洗脫緩沖液：50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉、1-2M NaCl、pH7.0
（注：結(jié)合液和洗脫液可根據(jù)樣品性質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)改變，原則是低鹽上樣高鹽洗脫）
平衡：用3-5個(gè)柱體積的平衡緩沖溶液進(jìn)行平衡，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、 pH值等參數(shù)不變。
上樣：樣品的預(yù)處理，樣品需至少用0.45μm濾膜過(guò)濾，在上樣，以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，也可通過(guò)線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量。
淋洗：用5-10個(gè)柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)基本不變。
（4）洗脫：使用 5-10 倍柱體積的洗脫液，收集洗脫峰。
（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料，然后保存在等體積的20%乙醇中，置于 4-8 ℃保存。
5.在位清洗（CIP）：
填料可以重復(fù)使用無(wú)需再生，但隨著非特異性結(jié)合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結(jié)合載量都下降，這時(shí)可按照下面方法對(duì)樹脂進(jìn)行清洗。
（1）去除一些沉淀或變性物質(zhì)：用 3-4 倍柱體積的0.1M NaOH，然后用3-4倍柱體積的70%乙醇或2M硫青酸鉀溶液清洗，然后立即用5倍柱體積的結(jié)合液平衡。
（2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)：用 3-4 倍柱體積的70%乙醇或30%的異丙醇或1% Triton X-100 清洗，然后立即用5倍柱體積的結(jié)合液平衡。
注意事項(xiàng)：
（1）使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果。
（2）本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇，4-8℃。
（3）運(yùn)輸：4-25℃，常，避光。
（4）僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。
藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF